高效液相色谱法(HPLC):利用糖的极性差异,通过氨基柱或糖柱分离,使用示差折光检测器(RID)或蒸发光散射检测器(ELSD)定量。该方法可同时分离葡萄糖及其他杂质,检测限低,适用于复杂体系分析,能准确测定工业葡萄糖的纯度。
气相色谱 - 质谱联用法(GC - MS):需先将样品衍生化,如硅烷化,然后通过气相色谱分离挥发性糖衍生物,再用质谱进行定性定量。此方法可检测痕量糖及异构体,适用于低聚糖组成分析,对于工业葡萄糖中微量杂质及葡萄糖异构体的检测较为有效,从而准确评估其纯度。
分光光度法:工业葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下使邻联甲苯胺生成蓝色物质,此有色物质在 625nm 波长下与葡萄糖浓度成正比。通过测定蓝色物质的吸光度,可计算样品中工业葡萄糖的含量,进而得到其纯度。
旋光度法:通过测量葡萄糖溶液的旋光度,检测葡萄糖的光学纯度,以确保其不含有其他光学异构体。因为葡萄糖具有旋光性,其旋光度与浓度有一定关系,在一定条件下,测量旋光度可推算出葡萄糖的纯度。
熔点测定法:纯物质的熔点比杂质混合物的熔点高且更加锐利。通过测量葡萄糖的熔点,可以对其纯度进行初步评估。将葡萄糖放入熔点管中,使用电热熔点仪加热,记录葡萄糖从固态转变为液态时的温度,与葡萄糖的标准熔点对比,可判断其纯度,但该方法一般只能进行定性或半定量分析。
化学滴定法:如菲林滴定法,基于碱性酒石酸铜溶液与还原糖的氧化还原反应,通过滴定消耗的葡萄糖标准溶液量计算葡萄糖值(DE 值),从而反映葡萄糖在样品中的含量,进而评估纯度。不过,此方法受其他还原糖干扰较大,适用于初步定量分析。